荧光染色法真菌荧光染色剂在真菌镜检中的应用
真菌感染的发病率呈上升趋势,真菌感染的快速诊断对临床实施抗真菌治疗至关重要,降低死亡率。
真菌感染实验室检查中的直接涂片染色镜检查可迅速为临床实践提供直观的病原学证据。目前,大多数实验室通常采用革兰染色法进行深真菌感染的染色镜检查,但真菌孢子和菌丝不易着色,不易区分背景颜色,检出率低。近年来,荧光染色法在真菌染色镜检查中的应用越来越广泛,特别是在浅真菌病的诊断中。
真菌荧光染色镜检 标本涂片后滴加1滴真菌荧光染色剂,盖上盖玻片,擦去多余染色剂,置于荧光显微镜下阅片。见到发出紫色荧光的真菌孢子、真菌丝和假菌丝等真菌结构记录为阳性。
相对于真菌培养鉴定,涂片染色镜检操作简便,可快速得到检测结果,为临床治疗提供依据。真菌的镜检方法有很多,目前大部分实验室对于深部真菌感染的涂片镜检多采用革兰染色法
荧光染色法是近年来应用于真菌镜检的染色方法,可用于各种疑似真菌感染的检查,染色液中的荧光增白剂能够特异地结合真菌细胞壁β-多糖成分,如几丁质、葡萄糖、纤维素。在荧光显微镜下,真菌孢子及菌丝发出黄绿色或淡蓝色荧光,与暗背景形成鲜明对比。
真菌菌丝经荧光染色,清晰可辨;经荧光染色的真菌孢子,与背景对比清晰,呈现出明显的立体感。因此,对镜检的镜下分辨能力而言,荧光染色法能够更加清晰地辨识真菌结构,无论在真菌的检出还是菌种的初步鉴定上均具有一定的优势。
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