【关键词】：真菌染色液品牌，真菌荧光染色剂品牌，真菌荧光染色试剂

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【摘要】：

【标题】：真菌荧光染色剂厂家真菌里面几丁质酶的作用,几丁质酶活性测定的方法

      真菌荧光染色剂厂家介绍几丁质酶在植物抗真菌病害中发挥着重要作用，其中可以水解真菌细胞壁的几丁质是重要的组成部分。真菌染色液厂家提示在正常情况下,植物几丁质酶的含量非常低,如果将外源几丁质酶基因导入植物,可增强植物抗真菌可以增强植物抗真菌病的能力,和几丁质酶基因与其他防御蛋白基因在植物和植物抗真菌疾病的能力将大大提高。

      真菌荧光染色剂品牌厂家介绍真菌几丁质酶（chitinase，CHT）活性的测定

　　真菌荧光染色试剂厂家参考Boller等（1983）的方法提取酶液并测定酶活。

      （1）真菌染色液厂家介绍酶液的提取：样品中加入1ml 0.1M的磷酸缓冲液（pH6.4，内含0.1g PVP）冰浴匀浆，4℃、12，000 rpm离心20 min，所得上清即为粗酶液；

      （2）真菌荧光染色试剂厂家介绍蛋白含量测定：考马斯亮蓝G-250染色法；

      （3）N-乙酰氨基葡萄糖标准曲线的制作：真菌荧光染色剂品牌厂家介绍N-乙酰氨基葡萄糖标准溶液与0.1M的四硼酸钾（pH9.2）溶液沸水浴3min，真菌染色液品牌厂家介绍冷却后加入对二甲氨基苯甲醛（DMAB）溶液37℃反应20min，测定反应液的OD585值后绘制标准曲线；

      （4）酶的活性测定：用浓盐酸和95%的乙醇配制10mg/ml的胶状几丁质溶液。真菌荧光染色试剂厂家介绍1ml胶状几丁质溶液中加入800μl 0.1M的磷酸缓冲液（pH6.4）和200μl酶液，37℃反应2h后沸水浴3min，10,000 rpm离心10min，100μl上清中加20μL 1M的磷酸缓冲液（pH7.1）和80μl 3%脱盐蜗牛酶溶液（w/v），37℃反应30min，加入100μl 0.1M的四硼酸钾（pH9.2）溶液，沸水浴3min，冷却后加入3ml DMAB溶液，37℃反应20min，测定反应液的OD585值。真菌荧光染色剂厂家介绍对照的设置：800μl 0.1M的磷酸缓冲液（pH6.4）和200μl酶液的混合液事先在沸水浴中煮沸10min以灭活CHT，再加入胶状几丁质溶液继续上述反应操作。真菌荧光染色剂品牌厂家提示酶的活性表示为样品每毫克蛋白中1min内由CHT催化反应生成的N-乙酰氨基葡萄糖量。